员工之窗









第一部分 普通动物区SOP
一、普通动物实验管理

㈠ 目的: 严格控制动物饲养、实验环境不受病源微生物的危害;保护动物的福利;维持环境的生物洁净度;确保动物实验与饲养环境的一致性。
 ㈡ 依据: 《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第 2 号,1988), 《实验动物环境及设施》(中华人民共和国国家标准,GB 14925-2001) 《医学实验动物管理实施细则》(中华人民共和国卫生部令第55号,1998)
 ㈢ 范围:工作人员、实验人员
 ㈣ 管理制度
1、实验人员进入开放系统动物饲养、实验室要预先申请、登记。无关人员未经许可,不得进入。
2、实验人员在工作时间外使用动物饲养、实验室,应提前一天通知管理人员。
3、实验人员在更衣室洗手消毒,着工作服、鞋、帽后,在本室人员陪同下进入;要保持动物饲养室和动物实验室的整洁、安静。
4、除实验、饲养必须用品外,其它物品不得带入。
5、实验人员必须凭出库票通过工作人员领用实验动物。
6、实验人员应爱护公用动物实验室的仪器设备,实验时如发生仪器设备故障等意外情况,应及时通知管理人员。
7、实验结束后应及时清理器械、药品;动物尸体按要求处理;污物、垃圾倒入指定区域。
8、实验动物室动物笼器具因防疫需要不准带出本饲养室外。
9、严禁私自把外来动物带入动物饲养室。如用特殊动物,需经主管负责人同意,通过检疫后方可进入动物饲养室。
10、动物如需外科手术,要选择合适的麻醉药品,实验时必须有兽医在场。
11、动物实验室每周消毒一次;本次动物实验后所用笼具要彻底消毒。
12、实验结束离开前,进行水、电检查,安全后方能离开,离开时要登记。
13、离开实验室时,工作服里面朝外叠好,防止病原散播。
14、实验动物中心工作人员应认真记录动物实验各种行为,如有意外及时通知相关人员
15、实验动物中心工作人员认真遵守实验动物饲养管理要求的各项制度,熟悉、掌握和各项操作规程,确保实验动物的质量和安全。
16、经常检查动物笼具设备是否良好,防止动物逃逸及其它事故的发生。下班前仔细检查门窗、水、电和煤气是否关闭。

二、犬操作规程

㈠ 目的:规范犬日常操作程序,保证种群及实验用犬的质量,严格控制饲养环境不受病源微生物的危害;保护动物的福利。
㈡ 依据:《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第 2 号,1988),《实验动物环境及设施》(中华人民共和国国家标准,GB 14925-2001),《医学实验动物管理实施细则》(中华人民共和国卫生部令第55号,1988)
㈢ 范围:犬组工作人员。
㈣ 管理制度
1.操作程序
 (1) 工作人员在更衣室洗手消毒,着工作服、鞋、帽后,用消毒药喷湿踏脚垫。
 (2) 检查种犬、哺乳期仔犬、育成犬、实验用犬等是否有异常现象,如有及时记录并汇报,处理后进行下一步工作。
 (3) 记录饲养和实验室温度、湿度。
 (4) 冲洗粪便、打扫卫生,定量给予饲料300g/天/只,种犬、育成犬每日喂饲两次,每日另加100克肉食。
 (5) 饮水瓶随时刷洗、消毒。
 (6) 做好记录、填清笼卡。根据家犬质量标准选择种犬。
 (7) 清扫地面,擦拭窗台,保持饲养间及分担区卫生。每月的第一周抽查。每周二、四10时-11时根据消毒标准药物消毒。
 (8) 下午2时-4时,进行第二次工作,顺序同上。
 (9) 发放动物前核实领取人笼具是否合乎要求,严格按照出库票上规格发放。
 (10) 动物发放完毕对刚才领取人占用面积3倍大小按消毒规则喷雾消毒。
 (11) 协助实验人员做好犬实验。
 (12) 待所有房间工作结束后,将废弃物送到指定区域。
2.犬管理标准
 (1)条件控制
① 室内温度 冬季控制在17—20℃,夏季控制在23-26℃;相对湿度40—70%;氨浓度<14ppm;噪声<60dB。
② 保持饲养间及分担区卫生。每周二、四10时-11时根据消毒标准药物消毒。
③ 产箱、笼具空出后,用2-5%NaOH 喷雾消毒。
 (2)健康犬外观标准
① 身体健壮、行动正常、反应灵敏。
② 四肢有力、肥胖适中。
③ 被毛紧密、清洁有光泽。
④ 眼睛明亮有神。
⑤ 天然孔清洁,无分泌物。
⑥ 呼吸正常。
 (3)选种要求
① 根据系谱选择繁殖力强、抗病力强的后代留做种犬。
② 个体要求标准同(2)。
③ 公种发育良好,体格健壮,性欲旺盛;
④ 母种产仔多,母性强,泌乳旺盛,生有4-6对乳头。
⑤ 初选,选择母犬的第2-4胎之后代离乳后转入育种群,按系谱打上耳号。
⑥ 再选,离乳90日后,从育种群选出生长发育好、外生殖器无缺陷者留做种用。
⑦ 定种,育种犬交配生产后,根据交配能力、受胎率、产仔率、成活率等再行选择,将符合条件者定做种用。
 (4)配种
① 配种的年龄 雄犬10-12个月龄,雌犬9-11个月龄,。
② 配种时间  夏季早晨为宜,冬季中午为宜。
③ 将发情期母犬按系谱送到公犬笼内进行交配。
④ 交配完成10分钟后将母犬送回原笼。
⑤ 第二天再送到原公犬笼内交配一次。
⑥ 在卡片上记录交配时间和雄犬号码。
 (5)妊娠和分娩
① 妊娠期一般为60-65天。
② 预产期前5-7天把经过消毒的产箱放入犬笼内。
③ 分娩后及时检查产箱,清除死胎污物。
④ 清点仔犬数,做好生产记录,填好繁殖卡。
⑤ 给予足够量的清洁饮水。
 (6)哺乳期管理
① 加强母犬营养,每日饲喂三次繁殖料。
② 每日察看仔犬哺乳量是否充足。
③ 幼犬30日龄注射疫苗;40-50日离乳,转入育成犬群饲养。
 (7)防疫
① 满月幼犬及时通知兽医注射疫苗,幼犬生后第30天、第45天、第60天各注射疫苗一次;每年3月、10月第一周再注射疫苗一次。
② 育成犬、种犬每月第一周周二用驱虫药一次。
③ 非工作人员禁止进入动物饲养室。

三、猫操作规程

㈠ 目的:规范猫日常操作程序,保证种群及实验用猫的质量,严格控制饲养环境不受病源微生物的危害;保护动物的福利。
㈡ 依据:《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第 2 号,1988),《实验动物环境及设施》(中华人民共和国国家标准,GB 14925-2001),《医学实验动物管理实施细则》(中华人民共和国卫生部令第55号,1988)
㈢ 范围:猫组工作人员。
㈣ 管理制度
1.操作程序
① 工作人员在更衣室洗手消毒,着工作服、鞋、帽后,用消毒药喷湿踏脚垫。② 检查种猫、哺乳期仔猫、育成猫、实验用猫等是否有异常现象,如有及时记录并汇报,处理后进行下一步工作。
③ 记录饲养和实验室温度、湿度。
④ 冲洗粪便、打扫卫生;定量给予饲料250g/只/天,种猫、育成猫每周各增喂100克熟鱼或熟肉;加足饮水,饮水瓶随时刷洗、消毒。
⑤ 做好记录、填清笼卡。根据家猫质量标准选择种猫。
⑥ 清扫地面,擦拭窗台,保持饲养间及分担区卫生。每月的第一周抽查。每周二、四10时-11时根据消毒标准药物消毒。
⑦ 下午2时-4时,进行第二次工作,顺序同上。
⑧ 发放动物前核实领取人笼具是否合乎要求,严格按照出库票上规格发放,动物发放完毕对刚才领取人占用面积3倍大小按消毒规则喷雾消毒。
⑨ 协助实验人员做好猫实验。
⑩ 待所有房间工作结束后,将废弃物送到指定区域。
2.猫管理标准
 (1)条件控制
① 室内温度冬季控制在17—21℃,夏季控制在24-26℃;相对湿度40—70%;氨浓度<14ppm;噪声<60dB。
② 持饲养间及分担区卫生。每周二、四10时-11时根据消毒标准药物消毒。
③ 产箱、笼具空出后,用2-5% NaOH 24小时浸泡消毒。
 (2)健康猫外观标准
① 身体健壮、行动正常、反应灵敏。
② 四肢有力、肥胖适中。
③ 被毛紧密、清洁有光泽。
④ 眼睛明亮有神。
⑤ 天然孔清洁,无分泌物。
⑥ 呼吸正常。
 (3)选种要求
① 根据系谱选择繁殖力强、抗病力强的后代留做种猫。
② 个体要求标准同(2)。
③ 公种发育良好,体格健壮,性欲旺盛;
④ 母种产仔多,母性强,泌乳旺盛,生有4-5对乳头。
⑤ 初选,选择母猫的第2-4胎之后代离乳后转入育种群,按系谱打上耳号。
⑥ 再选,离乳60日后,从育种群选出生长发育好、外生殖器无缺陷者留做种用。
⑦ 定种,育种猫交配生产后,根据交配能力、受胎率、产仔率、成活率等再行选择,将符合条件者定做种用。
 (4)配种
① 配种的年龄和体重  雄猫7-8个月龄,体重2.5kg以上,雌猫6-7个月龄,体重2.0kg以上。
② 配种时间  夏季早晨为宜,冬季中午为宜。
③ 将发情期母猫按系谱送到公猫笼内进行交配。
④ 交配完成10分钟后将母猫送回原笼。
⑤ 第二天在送到原公猫笼内交配一次。
⑥ 在卡片上记录交配时间和雄猫号码。
 (5)妊娠和分娩
① 妊娠期一般为60~65天。
② 预产期前6~7天把经过消毒的产箱放入猫笼内。
③ 分娩后及时检查产箱,清除死胎污物。
④ 清点仔猫数,做好生产记录,填好繁殖卡。
⑤ 给予足够量的清洁饮水。
⑥ 妊娠期应加强动物性蛋白的估给。
 (6)哺乳期管理
① 加强母猫营养,每日饲喂三次全价颗粒繁殖料。
② 每日察看仔猫哺乳量是否充足。
③ 330日龄撤出产箱,通知兽医注射疫苗;40~50日离乳,转入育成猫群饲养。
 (7)防疫
① 满月幼猫及时通知兽医注射疫苗,每年3月、10月第一周再注射疫苗一次。
② 育成猫、种猫每月第一周周二用驱虫药一次。
③ 非工作人员禁止进入动物饲养室。

四、豚鼠操作规程

㈠ 目的:规范豚鼠日常管理操作程序,保证种群及实验用豚鼠的质量,严格控制饲养环境不受病源微生物的危害;保护动物的福利。
㈡ 依据:《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第 2 号,1988),《实验动物环境及设施》(中华人民共和国国家标准,GB 14925-2001),《医学实验动物管理实施细则》(中华人民共和国卫生部令第55号,1988)
㈢ 范围:豚鼠组工作人员。
㈣ 管理制度
1.操作程序
 (1) 工作人员在更衣室洗手消毒,着工作服、鞋、帽后,用消毒药喷湿踏脚垫。
 (2) 检查种豚鼠、哺乳期仔豚鼠、育成豚鼠、实验用豚鼠等是否有异常现象,如有及时记录并汇报,处理后进行下一步工作。
 (3) 记录饲养室和实验室温度、湿度。
 (4) 冲洗粪便、打扫卫生,定量给予饲料35g/只/天,每日喂饲两次新鲜饲料。
 (5) 加足饮水。饮水瓶随时刷洗、消毒。
 (6) 做好记录、填清笼卡。
 (7) 清扫地面,擦拭窗台,保持饲养间及分担区卫生。每月的第一周抽查。每周二、四10时-11时根据消毒标准药物消毒。
 (8) 下午2时-4时,进行第二次冲洗粪便给与饲料工作,顺序同上。
 (9) 根据豚鼠质量标准选择种豚鼠。
 (10) 发放动物前核实领取人笼具是否合乎要求,严格按照出库票上规格发放。
 (11) 协助实验人员做好家兔实验。
 (12) 待所有房间工作结束后,将废弃物送到指定区域。
2.豚鼠管理标准
 (1)条件控制
① 室内温度冬季控制在19—22℃,夏季控制在23-26℃,相对湿度40—70%;氨浓度<14ppm;噪声<60dB。
②保持饲养间及分担区卫生。每周二、四10时-11时根据消毒标准药物消毒。
③产箱、笼具空出后,用2-5%NaOH24小时浸泡消毒。
 (2)健康豚鼠外观标准
① 身体健壮、行动正常、反应灵敏。
② 四肢有力、肥胖适中。
③ 被毛紧密、清洁有光泽。
④ 眼睛明亮有神。
⑤ 天然孔清洁,无分泌物。
⑥ 呼吸正常,门齿整齐 。
 (3)选种要求
① 根据系谱选择繁殖力强、抗病力强的后代留做种豚鼠。
② 个体要求标准同(2)。
③ 公种发育良好,体格健壮,性欲旺盛;
④ 母种产仔多,母性强,泌乳旺盛,生有2-3对乳头。
⑤ 初选,选择母豚鼠的第2-4胎后代,出生20天后转入育种群,。
⑥ 再选,出生30日后,从育种群选出生长发育好、外生殖器无缺陷者留做种用。
⑦ 定种,种豚鼠交配生产后,根据交配能力、受胎率、产仔率、成活率等再行选择,将符合条件者定做种用。
 (4)配种
① 配种的年龄 雄豚鼠6-7个月龄,重750g以上;雌豚鼠5-6个月龄,重700g以上。
② 配种时间  夏季早晨为宜,冬季中午为宜。
③ 在卡片上记录交配时间。
 (5)妊娠和分娩
① 妊娠期一般为65-70天。
② 预产期前5-6天单独饲养。
③ 分娩后及时检查产箱,清除死胎污物。
④ 清点仔豚鼠数,做好生产记录,填好繁殖卡。
⑤ 给予足够量的清洁饮水。
 (6)哺乳期管理
① 加强母豚鼠营养,每日加喂二次青饲料。
② 每日察看仔豚鼠生长状况。
 (7)防疫
① 育成豚鼠、种豚鼠每月第一周周二用驱虫药一次。
② 动物发放完毕对刚才领取人占用面积3倍大小按消毒规则喷雾消毒。
③ 非工作人员禁止进入动物饲养室。

五、兔操作规程

㈠ 目的:规范兔日常管理操作程序,保证种群及实验用兔的质量,严格控制饲养环境不受病源微生物的危害;保护动物的福利。
㈡ 依据:《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第 2 号,1988)《实验动物环境及设施》(中华人民共和国国家标准,GB 14925-2001)《医学实验动物管理实施细则》(中华人民共和国卫生部令第55号,1988)
㈢ 范围:兔组工作人员。
㈣ 管理制度
1.操作程序
① 工作人员在更衣室洗手消毒,着工作服、鞋、帽后,用消毒药喷湿踏脚垫。
② 检查种兔、哺乳期仔兔、育成兔、实验用兔等是否有异常现象,如有及时记录并汇报,处理后进行下一步工作。
③ 记录饲养和实验室温度、湿度。
④ 冲洗粪便、打扫卫生,定量给予饲料150g/天/只,种兔、育成兔每日喂饲两次新鲜饲料。饮水瓶随时刷洗、消毒;水箱每周彻底清洗消毒一次。
⑤ 做好记录、填清笼卡。根据兔质量标准选择种兔。
⑥ 清扫地面,擦拭窗台,保持饲养间及分担区卫生。每月的第一周抽查。每周二、四10时-11时根据消毒标准药物消毒。
⑦ 下午2时-4时,进行第二次冲洗粪便给与饲料工作,顺序同上。
⑧ 发放动物前核实领取人笼具是否合乎要求,严格按照出库票上规格发放,动物发放完毕对刚才领取人占用面积3倍大小按消毒规则喷雾消毒。
⑨ 协助实验人员做好兔实验。
⑩ 待所有房间工作结束后,将废弃物送到指定区域。
2.兔管理标准
 (1)条件控制
① 室内温度 冬季控制在17—22℃,夏季控制在24-26℃;相对湿度40—70%;氨浓度<14ppm;噪声<60dB。
② 保持饲养间及分担区卫生。每周二、四10时-11时根据消毒标准药物消毒。
③ 产箱、笼具空出后,用2-5%NaOH24小时浸泡消毒。
 (2)健康兔外观标准
① 身体健壮、行动正常、反应灵敏。
② 四肢有力、肥胖适中。
③ 被毛紧密、清洁有光泽。
④ 眼睛明亮有神。
⑤ 耳脉清晰。
⑥ 天然孔清洁,无分泌物。
⑦ 呼吸正常,门齿整齐,不流涎水。
 (3)选种要求
① 根据系谱选择繁殖力强、抗病力强的后代留做种兔。
② 个体要求标准同(2)。
③ 公种发育良好,体格健壮,性欲旺盛;
④ 母种产仔多,母性强,泌乳旺盛,生有4-5对乳头。
⑤ 初选,选择母兔的第2-4胎之后代离乳后转入育种群,按系谱打上耳号。
⑥ 再选,离乳60日后,从育种群选出生长发育好、外生殖器无缺陷者留做种用。
⑦ 定种,育种兔交配生产后,根据交配能力、受胎率、产仔率、成活率等再行选择,将符合条件者定做种用。
 (4)配种
① 配种的年龄和体重 雄兔7-8个月龄,体重3.0kg以上,雌兔6-7个月龄, 体重2.8kg以上。
② 配种时间  夏季早晨为宜,冬季中午为宜。
③ 将发情期母兔按系谱送到公兔笼内进行交配。
④ 交配完成10分钟后将母兔送回原笼。
⑤ 第二天在送到原公兔笼内交配一次。
⑥ 在卡片上记录交配时间和雄兔号码。
 (5)妊娠和分娩
① 妊娠期一般为30-35天,平均31天。
② 预产期前5-7天把经过消毒的产箱放入兔笼内。
③ 分娩后及时检查产箱,清除死胎污物。
④ 清点仔兔数,做好生产记录,填好繁殖卡。
⑤ 给予足够量的清洁饮水。
 (6)哺乳期管理
① 加强母兔营养,每日饲喂全价颗粒繁殖料,每日加喂二次青饲料。
② 每日察看仔兔哺乳量是否充足。
③ 30日龄撤出产箱,兽医注射疫苗;40—50日离乳,转入育成兔群饲养。
 (7) 防疫
① 满月幼兔及时通知兽医注射疫苗,每年3月、10月第一周再注射疫苗一次。② 育成兔、种兔每月第一周周二用驱虫药一次。
③ 动物发放完毕对刚才领取人占用面积3倍大小按消毒规则喷雾消毒。
④ 非工作人员禁止进入动物饲养室。

 


第二部分 SPF级实验动物及屏障系统SOP
一、人员物品进出动物实验屏障系统SOP

㈠ 目的: 控制屏障环境的生物洁净度,保障动物实验有序进行
㈡ 依据: 《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第 2 号,1988),《动物饲养设施条件要求》(中华人民共和国国家标准,2001)
㈢ 内容:
1、与动物实验无关人员、非该责任区的人员及有传染性疾病的人员均禁止进入动物屏障系统。
2、动物实验人员须经培训后方可进入屏障系统工作。
3、所有人员进出屏障系统时,须在动物登记本上填写姓名、目的、进出时间、携带物品。
4、人员在进入屏障区前,先换拖鞋,入更衣室脱下外套,一切个人用品如钥匙、饰物、手表、眼镜、通讯工具等不得带入。
5、进淋浴室刷牙、漱口、刷手、洗头、彻底洗浴,时间不少于10分钟,淋浴完毕后入无菌更衣室,打开灭菌包用灭菌毛巾擦干后分别戴上口罩、帽子,穿上内衣裤和连体的工作服、鞋套、拖鞋,将用过的毛巾灭菌包扔回淋浴室,浸泡双手,戴上消毒手套
6、入风淋室风淋1 分钟后进入动物实验区
7、进入清洁走廊→内储备间(提取所需用品)→饲育室进行工作;
8、在屏障系统内,人员进出时不能同时开启两扇门,并做到随手关门,以保证压差的维持;
9、在屏障系统内,人员应注意保持安静。
10、工作完毕后,将废弃物品等随人从非清洁走廊退出。
㈣ 物品进出的管理
1、凡可以清洗的物品(如饲养盒、饮水瓶等),在消毒灭菌处理前必须进行彻底的清洗;
2、进入屏障设施内的一切物品,必须严格按照设计的流向路线进入。根据物品的性质可分别通过高压蒸汽灭菌器和传递窗两种不同的途径消毒灭菌后进入;
3、耐高温高压灭菌的物品,均须经 121℃、30 分钟的高温高压灭菌处理,并确认灭菌指示纸达到安全状态后,放置在物品储藏室备用。
4、不耐高温高压灭菌的物品,须在传递窗内用 0.5% 过氧乙酸喷雾消毒,紫外灯照射 15 分钟后,从传递窗内侧带入屏障系统。
5、动物用的笼具、饲料、饮用水等物品从清洁储藏室分配至各饲养室。
6、消毒灭菌过的物品贮存时间不宜过长,一般在七天内用完最好;
7、每次更换下来的笼具、饮水瓶等物品通过污染走廊运至缓冲间,再由系统外的工作人员从缓冲间取出至清洗间清洗。
8、与动物实验无关的物品,不准带入屏障系统。
9、未经实验动物室工作人员同意,不准把动物笼器具带出屏障系统。 
㈤ 动物进出屏障设施的管理
1、所有实验动物必须从持有实验动物生产许可证的单位中谨慎购入,并做相应的隔离观察。
2、必须明确购入动物的品种(系)、性别、体重、数量、级别,购入的时间及动物质量合格证、动物遗传背景资料等;
3、动物到达后,检查运输盒的密封情况,对照订货条件进行验收;
4、将运输盒外表面用消毒液彻底擦拭消毒,放入传递窗,喷洒2%过氧乙酸溶液,用紫外线灭菌灯照射后,在内准备室打开包装,将动物移入饲养盒内,在动物隔离室观察一周,未见异常后转入饲养室。
5、传出动物时, 用已灭菌过的带过滤装置的专用运输盒装入动物后,封口胶布封严;
6、将传出动物的品种(系)性别、日龄、微生物等级等有关资料写在动物标签上,随人带出。
7、实验人员、工作人员不准虐待动物;不准在动物饲养室内处死动物。
8、工作人员、实验人员在工作中如发现有死亡动物时,应立即取出动物尸体,用塑料袋包装,在标签牌上记录动物死亡数、日期,并更换该鼠笼、笼盖、饲料及饮水瓶。双方人员及时沟通,分析死亡原因。
9、动物尸体用塑料袋包装后存放冰柜,集中焚烧处理。

二、各种消毒剂的配制操作规程

㈠ 目的:保证各种消毒液配制浓度的准确性。
㈡ 范围:动物饲育人员、技术人员。
㈢ 消毒液的配制与使用
1、消毒液的使用原则
⑴ 按各消毒液的用途,以周为单位交替轮换使用。
⑵ 各消毒剂不能混合配制使用。
⑶ 必须使用产品有效期内的消毒液。
2、0.5% 过氧乙酸的配制与使用
⑴ 把过氧乙酸 A、B 型溶液按 1:0.8 比例混合,放置 24 小时后使用。
⑵ 在盛有 998ml 清水的容器中加入 5ml 过氧乙酸混合液,混合均匀后即成 1000ml 0.5% 的过氧乙酸消毒液。
⑶ 0.5% 过氧乙酸消毒液用于动物屏障系统内擦拭、喷雾消毒,能快速杀灭各种细菌繁殖体、芽胞、霉菌和肝炎病毒等,同时有抑菌作用。
⑷ 过氧乙酸消毒液须在使用时配制。
3、2% 新洁尔灭(含苯扎溴铵5%)消毒液的配制与使用
⑴ 取新洁尔灭溶液 400ml,加入 600ml 清水中,混合均匀后即成 1000ml 的 2% 新洁尔灭消毒液。
⑵ 2% 新洁尔灭消毒液用于浸泡、擦拭消毒。
⑶ 新洁尔灭消毒液须在使用时配制。
4、5% 碘伏液的配制与使用
⑴ 按每 50ml 碘伏加 950ml 清水的比例配制,混合均匀后即成 1000ml 的 5% 碘伏消毒液。
⑵ 5% 碘伏液用于浸泡、擦拭消毒。
⑶ 碘伏液须在使用时配制。
5、300ppm 强效消毒剂(三氯异氰尿酸,含有效氯 30%)的配制与使用
⑴ 按 1000ml 清水中加入 1g 强效消毒剂的比例,充分溶解,混合均匀后,即成 300ppm 的强效消毒剂。
⑵ 强效消毒剂用于喷雾、浸泡、擦拭消毒。
⑶ 强效消毒剂须在配制 20 分钟后使用。
6、高锰酸甲+福尔马林消毒剂的配制与使用
⑴ 按 40% 的清水 + 30% 高锰酸甲 + 30% 福尔马林程序配制。
⑵ 高锰酸甲 + 福尔马林消毒剂用于屏障系统内的熏蒸消毒。

三、屏障系统动物实验室的SOP

㈠ 目的:严格控制动物实验环境不受病源微生物的危害;保护动物的福利;维持屏障环境的生物洁净度;确保动物生产与实验环境的一致性
㈡ 依据:《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第2     号,1988),《实验动物环境及设施》(中华人民共和国国家标准,GB 14925-2001),
㈢ 屏障环境的消毒SOP 
1、启用前的消毒
⑴ 清洁屏障环境,检查设施、设备状况。开启空调通风系统自净1周。
⑵ 用 2% 的新洁而灭和 300ppm 的强效消毒剂交替擦拭饲养室、走道、缓冲间、更衣室、风淋室的四壁、顶部、地面,并清洗进出风口。
⑶ 次日用 5% 的碘伏重复擦拭,并用 0.5% 的过氧乙酸喷雾消毒环境。
⑷ 关闭通风系统。
⑸ 用 40% 清水 + 30% 高锰酸钾 + 30% 甲醛熏蒸屏障系统内各区域。
⑹ 请实验动物质量检验监督站检测屏障环境各饲养室、走道、缓冲间、更衣室、风淋室的空气落下菌,合格后方可投入使用。
2、日常消毒
⑴ 每个工作日须用配制好的消毒液随时擦拭每层笼架。
⑵ 结束每次的实验工作后,清洁地面,然后用另一种消毒液擦拭地面。
⑶ 用 0.2% 的过氧乙酸喷雾消毒环境。
⑷ 结束所有工作后,用消毒液擦拭走道、缓冲间地面。
⑸ 每月更换出风口滤材,并用消毒液清洁擦拭进出风口。

四、笼具、饮水瓶的清洗与消毒SOP

㈠ 目的:建立笼具消毒操作规程,预防疾病的发生;保护动物的福利;维持屏障环境的生物洁净度;确保动物生产与实验环境的一致性。
㈡ 范围:饲育人员
㈢ 内容:
1、鼠笼每周至少更换 2 次,笼盖每 2 周更换 1 次,饮水瓶每天更换,饲养笼架每月擦拭消毒 1 次。
2、每批动物取走后,必须更换该批动物的笼具、水瓶,用消毒液擦拭笼架、饲养室,喷雾消毒,紫外照射后,放置下一批的动物。
3、每次更换后的脏笼具放到污染走廊并关紧门,待所有房间工作结束后,统一经污染走廊送至缓冲区。
4、从缓冲区取出脏笼具放置于洗刷室指定的区域;把笼盖先放在盛有消毒液的器具中浸泡,30 分钟后刷洗干净。
5、在清洗池中刷洗水瓶内壁及饮水嘴管;每2周用温水加洗洁精液刷洗饮水瓶、饮水嘴管,并用清水充分冲洗干净。
6、在垫料倾倒机内用刮板刮去脏笼内的垫料等污物,在清洗池中刷洗笼具内外壁,并用消毒液浸泡30分钟,沥干,用消毒布包好等待高压灭菌。垫料等污物用专用塑料袋包装,集中处理。

五、饲料、垫料和饮用水的消毒管理SOP

㈠ 目的:建立一个饲料、垫料选择、灭菌消毒操作规程,保证质量,防止外来㈡ 微生物及寄生虫的感染。
㈢ 范围:采购、消毒人员。
㈣ 内容:
1、检查饲料的生产日期(批号),是否在保质期内,包装是否符合国家标准 GB 14924.1-2001。
2、每批饲料须感官检查,要求新鲜、无杂质、无异味、无霉变、无虫蛀及鼠咬。
3、每批 Co60 饲料的存放期不超过 6 个月,发现包装有破损或漏气应挑出。
4、垫料应选择无刺激味、无毒性、无油脂、无杂质、色泽较白、手感松软、形状均匀、有较强的吸水性,并有吸臭气的作用,经过筛选的垫料(细碎刨花、粉碎的玉米棒及秆、吸水纸及棉花)。
5、垫料经 121℃、30min 高温、高压灭菌,取出放在密闭的容器封口,贮存在屏障区内储备间,可使用一周。
6、饮用水为纯水机生产,并经 121℃、30min 高温、高压灭菌处理。
7、动物的瓶装水必须每天更换。

六、屏障内实验动物饲育管理SOP

㈠ 严格按人员、物品进出屏障设施的规定和要求操作,单向流动,严禁逆向返回。
㈡ 屏障内饲养室所有门口设有挡鼠板;进、出房间门时要检查是否放好。
㈢ 准备当天所需物品。(包括鼠笼、饮水、消毒液、饲料等)
㈣ 按周计划表进行动物换笼、断乳、配种、卫生、消毒等工作;必须使用消毒液浸泡的镊子夹取动物。
㈤ 每天记录饲育室内温、湿度等环境因素,出现异常,及时汇报。
㈥ 及时更换饮水和添加饲料,不得出现断缺。
㈦ 每天坚持检查母鼠生产、哺乳情况,及时调整哺乳仔数,观察动物生长状况及有无漏水等现象,做好卡片记录,工作日记和周报表。
㈧ 日常工作完毕,应将室内物品摆放整齐,清扫地板,彻底擦拭消毒地板一遍。每周五还应对屏障内所有其它区域及物品进行擦拭消毒,之后用消毒液对屏障内所有区域进行喷雾消毒。
㈨ 按规定开关照明灯、紫外灯。

七、SPF级大、小鼠繁育、日常饲养管理SOP

㈠ 目的:建立、规范SPF级大、小鼠繁育及日常饲养管理操作规程,保证大、小鼠种群质量及实验用鼠质量。
㈡ 范围:SPF级大、小鼠饲育人员。
㈢ 内容:
1、选种:
⑴ 外观检测:背毛浓密而有光泽、紧贴身体、乳白色、不易脱落;机体丰满、健壮有力;眼睛鲜红而有精神;四肢短、部位正常、动作敏捷;尾巴圆长,不显节、为弯曲、色分红不暗;身上无瘢痕与溃疡斑,粪便正常;天然孔干净,无分泌物,呼吸正常,呼吸时不会发出声音。
⑵ 经系谱鉴定:选用父母繁殖力强,母鼠每胎产仔8只以上、成活率高、体质健壮的仔鼠;雄性睾丸紧绷,双侧发育一致;雌鼠臀部丰满,乳腺明显,生殖器正常,哺乳能力强。
⑶ 初选:从第2—4胎种选出生长发育好、离乳时体重大鼠达50g以上,小鼠达12g以上的仔鼠。同父不选两性。
⑷ 再选:离乳后一周,大鼠体重达90g以上,小鼠体重达15g以上,发育良好、大小均匀、符合健康标准的。
⑸ 定种:出生后10—12周,大鼠雄性体重达350g以上,雌性体重达250g以上;小鼠雄性体重达30g以上,雌性体重达25g以上。
2、配种:按不同品系配种原则,一雌一雄或二雌一雄终生同居,并注明配种日期、挂号卡片(按系普同居);配后10日内母鼠不孕,刚更换公鼠,如仍不孕则淘汰母鼠;仔鼠出生后记录出生日期、胎次、产仔数、留养数和死亡数;母鼠生产四胎后淘汰;雄鼠在母鼠怀孕第四胎时淘汰。
3、哺乳:每只母鼠带仔不超过8—10只;18—20天(体重大鼠达45g以上,小鼠达10g以上)则离乳分养,转入待发群。
4、日常饲养管理SOP
⑴ 饲育人员当日早晨进入屏障区前检查是否有领取大、小鼠预定单。
⑵ 饲育人员按屏障区规定流程进入屏障区,从内储备间将当天所需物品(包括鼠笼、饮水、消毒液、饲料等)经清洁走廊运至饲养室。
⑶ 饲育人员进入饲养室应首先检查:饲养室的门是否严密有无漏洞、破损;档鼠板是否安放正常;
⑷ 进入室内检查、记录温度、湿度、压差等。
⑸ 检查繁育盒是否有新生鼠并按卡片内容做好登记。
⑹ 繁育鼠、待发育成鼠盒内有无饮水和饲料,有无病、死或其他异常现象;有无超重须及时剔除的大、小鼠;
⑺ 如果有异常现象,须及时向领导汇报,得到及时妥善处理后,进行下一步工作。
⑻ 繁育盒内是否有需要离乳的仔鼠,如有即使离乳;对离乳的仔鼠,称重,按体重大小、性别分盒,移至育成待发室饲养。
⑼ 按当天早晨领鼠预定单,将鼠按要求选好放在动物传递窗,由屏障外工作人员移至外间IVC笼架上。
⑽ 更换消毒笼盒,将换下的鼠盒及废弃物搬至污染走廊,换新鲜的饮水瓶,定量加补饲料(大鼠20-25g/只/日;小鼠4—5g/只/日)。
⑾ 整理房间,清扫卫生,用消毒液擦拭室内台面、地面,紫外线消毒。
⑿ 待所有房间工作结束后,将污染走廊上的鼠盒及废弃物送至缓冲区,由屏障外工作人员搬到洗刷室。
⒀ 清扫污染走廊卫生,用消毒液擦拭地面,紫外线消毒,退出屏障区。
⒁ 将工作服、帽子、口罩、鞋、手套等脱下用专用布袋装好,放在指定位置。
⒂ 整理工作日记,做好次日工作准备(笼盒、饮水瓶、配制消毒液等)。

八、无菌工作衣的清洗与消毒管理 SOP

㈠ 目的:建立屏障系统工作衣清洗程序,保证工作衣不对实验产生影响。
㈡ 范围:SPF区待清洗工作衣、口罩、鞋套。
㈢ 责任:SPF区饲育人员、实验人员需对本操作程序程序实施负责。
㈣ 设备及用具:洗衣机、洗涤剂、熨斗、熨衣板、塑料盆、鞋刷。
㈤ 内容:
1、进入屏障系统的人员必需穿着无菌工作衣且为一次使用。
2、实验人员把SPF区换下的工作服、鞋套、鞋等清点数量,并记录,再分别装入布袋中,扎好布袋口、放入指定位置。
3、清洗工从一更衣室,取出布袋。
4、将口罩、工衣分开按如下顺序分次清洗:口罩、工衣、鞋套、鞋;洗净晾干后装入专用消毒布袋准备高压灭菌。
2、所有无菌工作衣必须经 121℃、30 分钟高温高压灭菌后使用。
3、经灭菌处理的工作衣放置在内更衣室衣柜内。
4、每次使用后清洗、凉干后放入专用灭菌盒,交由专业人员灭菌处理。
5、经灭菌处理的无菌衣,如果 2 周没有使用,则应取出重新灭菌后使用。
6、无菌工作衣的使用期限为一年。

九、独立通风笼盒(IVC)SOP

㈠ 目的: 保持动物有舒适的生活环境,避免动物受病源微生物的影响
㈡ 依据: 《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第2号,1988),《动物饲养设施条件要求》(中华人民共和国国家标准,2001),Guide for the Care and Use of Laboratory Animals(National Academy press Washington D.C.1996)
㈢ 内容:
1、动物实验室要求与配置:空调、220V 电源插座、照明与紫外灯、超净工作台、不锈钢工作车。
2、饲料、饮水和垫料:小包装灭菌全价颗粒饲料或无菌辐照全价颗粒饲料;高压灭菌水或无菌纯水;小包装灭菌垫料或无菌辐照垫料。
3、IVC 系统操作规范
⑴ 通过空调将室内温度控制在 23℃ 左右,每天上下班记录温度及送排风机组运行情况。
⑵ 超净工作台使用前 30 分钟用化学消毒药进行超净工作台操作面表面消毒,同时放入经表面消毒的使用物品,启动超净工作台,并打开紫外灯。
⑶ 关闭紫外灯,开始使用超净工作台。
⑷ IVC 上的动物饲育盒必须在超净工作台内打开,并进行相应的无菌操作。
⑸ 动物饲育盒必须在超净工作台内盖好上盖后,方能离开超净工作台。
⑹ 按要求将饲育盒放入 IVC 饲育架上。
⑺ 工作完毕后整理超净工作台,使用消毒液进行操作台的消毒,并关闭电源
⑻ 每天检查动物情况和水、饲料情况,每周更换垫料二次。
⑼ 每周清洗风机进气过滤网一次。
⑽ 每批动物试验结束后,彻底清洗饲育盒,并经 0.5% 过氧乙酸浸泡消毒,同时用消毒液清洗消毒 IVC 送排风嘴。

十、超净工作台的使用管理SOP

㈠ 目的: 维持屏障系统的生物洁净度,保护工作人员的安全,维护动物福利,保障机组的正常运转,尽量减少可影响科研成果的各种可变因素
㈡ 原则: 屏障系统内的超净工作台只能用于建立动物模型的手术、转基因小鼠的日常操作
㈢ 使用管理
1、每次使用超净工作台时,实验人员应先开启超净工作台上的紫外灯,紫外照射 30 分钟后使用。
2、开启超净工作台工作电源,关闭紫外灯,开启风机运行15分钟,用 75% 的酒精或 0.5% 过氧乙酸喷洒擦拭消毒工作台面。
3、整个实验过程中,实验人员应按照无菌操作规程操作。
4、实验结束后,用消毒液擦拭工作台面,关闭工作电源,重新开启紫外灯照射 15 分钟。
5、如遇机组发生故障,应立即通知实验动物室,由专业人员检修合格后继续使用。
6、实验人员应注意保持室内整洁。
7、超净工作台的滤材每个月更换一次,并作好更换记录。

十一、传递窗的使用管理SOP

㈠ 目的: 不耐高温、高压灭菌方法灭菌的物品传人屏障系统的灭菌方法
㈡ 依据: 《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第 2 号,1988),《动物饲养设施条件要求》(中华人民共和国国家标准,2001)
㈢ 内容:
1、用 0.5% 过氧乙酸或 5% 碘伏液擦拭待传递的物品。
2、打开传递窗外侧门,迅速放置待传递物品,用 0.5% 过氧乙酸喷雾消毒传递窗,关闭传递窗外侧门。
3、开启传递窗内的紫外灯,紫外照射待传递物品不少于 15 分钟。
4、通知屏障系统内的实验人员或工作人员,打开传递窗内侧门,取出物品。
5、关闭传递窗内侧门。

十二、风淋室的使用管理SOP

㈠ 目的: 保持风淋的安全使用,维持屏障环境的生物洁净度
㈡ 依据: 《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第 2 号,1988),《动物饲养设施条件要求》(中华人民共和国国家标准,2001)
㈢ 风淋室的使用
1、进入屏障环境的人员应在外更衣室脱去外衣,除下手表、手机、饰品等物品。
2、进入内更衣室,穿戴净化衣、帽、口罩、手套。
3、人员进入后,立即关闭外门,风淋自动启动 1 分钟(已设置)。
4、风淋结束,进入屏障环境。
㈣ 风淋室的管理
1、风淋室由责任人管理,每季度定期更换初效滤材。
2、每 2 年更换风淋室的高效滤材。
3、应轻开轻关风淋室内、外门。
4、遇风淋室发生故障时,应及时报专业维修人员修理。一般情况下不准启动手动按钮。

十三、蒸汽发生器的使用管理SOP

㈠ 目的: 确保高压容器的操作安全。
㈡ 依据: 《钢制压力容器》GB 150 – 1998和《钢制化工容器制造技术要求》HGJ18 – 89
㈢ 内容:
1、打开电源开关,电源指示灯亮。
2、打开进水阀向锅内加水,当水位至预定位置后,停止加水,关闭进水阀。
3、电热管开始加热。当汽压超过要求时,自动切断交流接触器;当低于压力要求时,交流接触器自动吸合加热,当水位低于下水位探针时,自动切断电源。
4、工作结束后,关闭电源,排空锅内剩水。
5、填写大型仪器设备使用记录(当日工作记录)。
㈣ 注意事项
1、当蒸汽发生器有残余蒸汽时,严禁向蒸汽发生器加水。
2、每隔 6 月定期清洗一次锅体内水垢。
3、定期检查电气连接和是否有损伤、烧焦现象。

十四、高压灭菌器的使用管理SOP

㈠ 目的: 确保高压容器的操作安全;严格控制动物实验环境不受病源微生物的危害;维持环境的生物洁净度 
㈡ 依据: 《钢制压力容器》GB 150 – 1998 和《钢制化工容器制造技术要求》HGJ18 – 89,《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第2号,1988),《实验动物环境及设施》(中华人民共和国国家标准,GB 14925-2001)
㈢ 内容:
1、蒸汽发生器加热,当压力达 0.2 Mpa 时,打开蒸汽手动阀,给夹层预热 30 分钟,结束后,排掉冷凝水。
2、开关机动门时,门前必须下列各项:
⑴ 行程显示在“准备”或“结束”状态。
⑵ 内室压力显示在 0 Mpa。
⑶ 可开门的指示灯亮。
3、灭菌物的正确放入方法:
⑴ 注意灭菌物品的均匀性,包装尽量小,且宽松放入。
⑵ 不要将盖严的瓶子及消毒液放入容器。
⑶ 不要将潮湿的灭菌物品放入,以便于干燥。
4、检查水源压力(0.15--0.3 Mpa);压缩空气压力(0.15--0.3 Mpa);气源压力(0.3--0.4 Mpa);电源:380V、220V是否满足要求。符合要求后,选择“自由设定”程序,将该程序所有参数设置好后,按“启动”键进行灭菌。
5、消毒结束,当符合开门条件,打开清洁侧门,取出灭菌物品。
6、工作结束后,关闭电源。
7、填写大型仪器设备使用记录(当日工作记录)。
㈣ 注意事项
1、本设备灭菌物品为耐高温、高湿物品,不能对液体、油脂类物品进行灭菌。
2、门的打开,参照《门的操作方法》,并检查门的密封材料有无开裂等情况。
3、放入或取出灭菌物品时,请注意不要被烫伤。
4、在使用过程中,经常检查压力表的指示情况。
5、压力达 0 .25Mpa 以上时,关闭进蒸汽阀,切断电源,对供汽管路进行检查。
6、定期自行检查,以保持本设备的性能。

 



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